決明子中黃曲霉含量檢測的免疫親和柱法

簡介

黃曲霉(AFT)是一種毒性很強的肝, 可引起肝臟的急慢性損害， 同時還對等其他多種組織造成影響, 并具有致癌、致畸、致細胞突變的作用。 ATF廣泛存在于玉米、麥類、稻谷等農產品以及堅果、花生和動物飼料中，近年來, 有陸續報道我國中草藥材上ATF污染也很嚴重,。

為此，我國不斷擴大對材中黃曲霉含量的檢測領域，并制定相關檢測標準以加強對材的質量管控。

黃曲霉總量的測試方法

實驗耗材：黃曲霉總量免疫親和柱

參照標準：《中國藥典2015年版*四部》

實驗部分

一、樣品提取

準確稱取5.0 g粉碎后決明子樣品置于50mL離心管中，加入1 g，加入25 mL 70%甲醇溶液，于渦旋儀上渦旋2min，在5000 r/min下離心5min，取5 mL上清液，用水定容至20 mL，過濾，取10 mL待凈化。

二、免疫親和柱凈化

(1) 上樣：將20 mL上樣器連接于免疫親和柱上端，取待凈化液以1-2滴/秒的速度通過免疫親和柱，棄掉流出的液體。

(2) 淋洗和洗脫：用20 mL水淋洗柱子，分兩次淋洗，棄去流出的液體；抽干小柱；加入2×1 mL甲醇洗脫，抽干小柱，收集洗脫液。

(3) 重新溶解：洗脫液在45℃氮吹至近干，0.5 mL初始流動相復溶，混勻，經0.22 μm濾膜過濾，供上機測試。

三、儀器條件

儀器測試條件（僅供參考）

3.1 液相條件

表1 梯度洗脫

3.2質譜條件

四、實驗結果

表2. 決明子中0.02 mg/kg黃曲霉B1,黃曲霉G1和0.007mg/kg黃曲霉B2,黃曲霉G2的添加回收結果

1決明子中的黃曲霉B1

2決明子中的黃曲霉 B2

3決明子中的黃曲霉G1

4決明子中的黃曲霉G2