玉米赤霉烯酮免疫親和柱

玉米赤霉烯酮免疫親和柱

簡介
ZEN免疫親和柱適用于基質復雜、**要求低的樣品中玉米赤霉烯酮檢測的凈化。可以進行TLC、HPLC、GC、LC-MS/MS、EIA的定量分析，適用于谷物，食品，飼料等的樣品凈化過程。
儲存條件：2 8 冷藏保存， 不可冷凍
1、用途：用于實驗室凈化樣品提取物以進行進一步分析
2、概要：玉米赤霉烯酮首先從有赤霉病的玉米中分離得到 玉米赤霉烯酮其 產毒菌主要是鐮刀菌屬的菌 株玉米赤霉烯酮主要污染玉米、小麥、大米、大麥、小米和燕麥等谷物 。
玉米赤霉烯酮具有雌激素作用，能造成動物急慢性中毒，引起動物繁殖機能異常甚至死亡 對人類的健康也造成很大威脅。**對食品，飼料中的玉米赤霉烯酮都有嚴格的**標準。
3、原理：測定的基礎是抗原抗體反應，免疫親和柱中含有和玉米赤霉烯酮抗體結合在一起的凝膠， 樣品中的玉米赤霉烯酮經過提取、過濾、稀釋，然后緩慢的通過免疫親和層析柱，在免疫親和柱內 玉米赤霉烯酮 與抗體結合， 其他的無關物質不會結合而直接通過免疫親和柱， 之后洗滌免疫 親和柱除去沒有被結合的其他無關物質。 最后加入甲醇將玉米赤霉烯酮 釋放， 然后注入到分析儀器中 進行進一步的檢測。
4、產品信息
貨號、規格、數量、柱容量
C14003、1mL、25支、≥500ng
C15003、3mL、20支、≥750ng
C15007、3mL、20支、≥1500ng
C15207、3mL、100支、≥1500ng
5、操作者應注意事項：
? 玉米赤霉烯酮對人體有害，應戴手套操作。
? 使用過的玻璃容器及玉米赤霉烯酮溶液較好用5%濃度的次氯酸鈉溶液浸泡過夜。
? 不要使用過了有效日期的免疫親和柱。
? 親和柱于2 8 冷藏保存，不可冷凍。
? 使用前，免疫親和層析柱需回至室溫 22 25 ℃）。
6、操作流程
? 粉碎好的樣品過20 目篩并在取樣前徹底混合，不立即分析的樣品應放在冰箱中儲存。
? 稱取20g 粉碎樣品及4g 氯 化鈉，加入100mL90% 乙腈/水。
? 高速均質約5 分鐘，或震蕩器震蕩約30 分鐘。
? 4000轉離心5min或普通定量濾紙過濾。
? 取5mL 濾液加入20mL 純水，徹底混合用玻璃纖維濾紙過濾至澄清
? 將10mL 注射器連接于免疫親和柱上端。
? 取處理好的樣液10mL10mL（相當于0.4g 樣品）以1 2滴/秒的速度通過免疫親合柱，棄掉流出的液體。
? 加10mL 水淋洗柱子兩次，棄掉流出的液體。
? 利用真空設備壓入空氣或用注射器吹干柱中水分。
? 加入1mL 甲醇緩慢洗脫，流速約為2 3 秒每滴。
? 收集全部洗脫液于干凈的比色皿或其他容器中用于檢測。
*糧谷類樣品用水稀釋，發酵類或雜質干擾很大的樣品提取液，則用20mMPBS進行較大倍數的稀釋（一般為10倍），以確保親和柱中玉米赤霉烯酮抗體與樣品提取液中抗原特異性結合的能力不受影響。
*20mMPBS：0.62g NaH 2 PO 4 ?2H 2 O + 5.73gNa 2 HPO 4 12H 2 O+9g NaCl ，蒸餾水溶解并定容至1000 mL ，調 PH 至 7.4 。

7、操作流程圖操作流程圖

8、液相色譜測定條件液相色譜測定條件
? 液相色譜柱：C18柱（柱長150mm，柱內徑4.6mm；填料粒徑5μm），或相當者；
? 熒光檢測器：激發/**波長：274nm/440nm
? 流動相：乙腈-水-甲醇（46+46+8）
? 流速：1mL/min
? 進樣量：20μL
? 柱溫：35℃
用進樣器吸取玉米赤霉烯酮標準工作液注入高效液相色譜儀，在上述色譜條件下測定標準溶液的響應值（峰 高或峰面積），得到玉米赤霉烯酮標準溶液高效液相色譜圖。


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